Экспериментальное тестирование химиорезистентности опухолевых клеток рака яичников

Одной из наиболее сложных проблем в лечении больных раком яичников является высокий уровень химиорезистентности опухолевых клеток, что обусловливает раннее развитие рецидива заболевания и низкие показатели общей выживаемости. В случае химиорезистентности терапия оказывается неэффективной, вызывает неоправданный расход лекарственных препаратов, наносит ущерб пациенту из-за развития побочных токсических эффектов и временных потерь на ее проведение. Одним из подходов к решению этой проблемы является экспериментальное предиктивное тестирование химиорезистентности опухолевых клеток in vitro.
Цель исследования – разработка протокола экспериментального тестирования химиорезистентности клеток рака яичников к химиотерапевтическим препаратам.
Мы проанализировали изменение количества жизнеспособных клеток линий A-1847, Ovcar-3 и Ovcar-4 при их культивировании в гипоадгезионных условиях и оптимизировали метод определения жизнеспособности клеток по метаболизму резазурина. Выявлено, что жизнеспособность клеток рака яичников исследуемых линий в присутствии препаратов 1-й и 2-й линий противоопухолевой терапии, измеренная в соответствии с разработанным протоколом культивирования в гипоадгезионных условиях с использованием набора ATP-tumor chemosensitivity assay (ATP-TCA) (DCS Innovative Diagnostik-Systeme, Германия), одобренного для применения в клинической практике в Германии, находится примерно на одном уровене. Разработанная методика основана на использовании доступных и недорогих реагентов и расходных материалов, что делает ее экономически привлекательной. 

1. Злокачественные новообразования в России в 2023 году (заболеваемость и смертность). Под ред. А.Д. Каприна, В.В. Старинского, А.О. Шахзадовой. Москва. МНИОИ им. П.А. Герцена − филиал ФГБУ «НМИЦ радиологии» Минздрава России, 2024. 276 с.

2. Siegel R.L., Kratzer T.B., Giaquinto A.N. et al. Cancer statistics, 2025. CA Cancer J Clin 2025;75(1):10–45. DOI: 10.3322/caac.21871

3. Покатаев И.А., Дудина И.А., Коломиец Л.А. и др. Рак яичников, первичный рак брюшины и рак маточных труб. Злокачественные опухоли 2024;14(3s2–2):82–101. DOI: 10.18027/2224-5057-2024-14-3s2-1.2-02

4. Ledermann J.A., Matias-Guiu X., Amant F. et al. ESGO–ESMO–ESP consensus conference recommendations on ovarian cancer: pathology and molecular biology and early, advanced and recurrent disease. Ann Oncol 2024;35(3):248–66. DOI: 10.1016/j.annonc.2023.11.015

5. Pignata S., Cecere S.C., Du Bois A. et al. Treatment of recurrent ovarian cancer. Ann Oncol 2017;28(suppl_8):viii51–6. DOI: 10.1093/annonc/mdx441

6. Miras I., Estévez-García P., Muñoz-Galván S. Clinical and molecular features of platinum resistance in ovarian cancer. Crit Rev Oncol Hematol 2024;201:104434. DOI: 10.1016/j.critrevonc.2024.104434

7. Havasi A., Cainap S.S., Havasi A.T., Cainap C. Ovarian cancer – insights into platinum resistance and overcoming it. Medicina (Kaunas) 2023;59(3):544. DOI: 10.3390/medicina59030544

8. Baert T., Ferrero A., Sehouli J. et al. The systemic treatment of recurrent ovarian cancer revisited. Ann Oncol 2021;32(6):710–25. DOI: 10.1016/j.annonc.2021.02.015

9. Monk B.J., Herzog T.J., Tewari K.S. Evolution of chemosensitivity and resistance assays as predictors of clinical outcomes in epithelial ovarian cancer patients. Curr Pharm Des 2016;22(30):4717–28. DOI: 10.2174/1381612822666160505114326

10. Имянитов Е.Н. Принципы индивидуализации противоопухолевой терапии. Практическая онкология 2013;14(4):187–94.

11. Кирсанов К.И., Кузин К.А., Фетисов Т.И. и др. Методические подходы к экспериментальному тестированию резистентности клеток опухоли человека к химиотерапии. Сибирский онкологический журнал 2020;19(3):122–36. DOI: 10.21294/1814-4861-2020-19-3-122-136

12. Singh T., Neal A.S., Moatamed N.A., Memarzadeh S. Exploring the potential of drug response assays for precision medicine in ovarian cancer. Int J Mol Sci 2021; 22(1):305. DOI: 10.3390/ijms22010305

13. Blom K., Nygren P., Larsson R., Andersson C.R. Predictive value of ex vivo chemosensitivity assays for individualized cancer chemotherapy: a meta-analysis. SLAS Technol 2017;22(3):306–14. DOI: 10.1177/2472630316686297

14. Maru Y., Hippo Y. Current status of patient-derived ovarian cancer models. Cells May 2019;8(5):505. DOI: 10.3390/cells8050505

15. Blumenthal R.D. An overview of chemosensitivity testing. Methods Molecul Med 2005:110:3–18. DOI: 10.1385/1-59259-869-2:003

16. Grendys E.C., Florica J.V., Orr J.W. et al. Overview of a chemoresponse assay in ovarian cancer. Clin Transl Oncol 2014;16(9):761–9. DOI: 10.1007/s12094-014-1192-8

17. Konecny G., Crohns C., Pegram M. et al. Correlation of drug response with the ATP tumorchemosensitivity assay in primary FIGO stage III ovarian cancer. Gynecol Oncol 2000;77(2):258–63. DOI: 10.1006/gyno.2000.5728

18. Kurbacher C.M., Cree I.A. Chemosensitivity testing using microplate adenosine triphosphate-based luminescence measurements. Methods Mol Med 2005;2005;110:101–20. DOI: 10.1385/1-59259-869-2:101

19. Andreotti P.E., Cree I.A., Kurbacher C.M. et al. Chemosensitivity testing of human tumors using a microplate adenosine triphosphate luminescence assay: clinical correlation for cisplatin resistance of ovarian carcinoma. Cancer Res 1995;15;55(22):5276–82.

20. Cortesi M., Warton K., Ford C.E. Beyond 2D cell cultures: how 3D models are changing the in vitro study of ovarian cancer and how to make the most of them. Peer J 29;12:e17603. DOI: 10.7717/peerj.17603

21. Denry Sato J., Kan M. Media for culture of mammalian cells. Curr Protoc Cell Biol. 2001;Chapter 1:Unit 1.2. DOI: 10.1002/0471143030.cb0102s00

22. Neubauer H., Stefanova M., Solomyer E. et al. Predicting resistance to platinum-containing chemotherapy with the ATP tumor chemosensitivity assay in primary ovarian cancer. Anticancer Res 2008;28(2A):949–56.

23. Nanki Y., Chiyoda T., Hirasawa A. et al. Patient-derived ovarian cancer organoids capture the genomic profiles of primary tumours applicable for drug sensitivity and resistance testing. Sci Rep 2020;10(1):12581. DOI: 10.1038/s41598-020-69488-9

24. Rodríguez-Corrales J., Josan J.S. Resazurin live cell assay: Setup and fine-tuning for reliable cytotoxicity results. Methods Mol Biol 2017;1647:207–219. DOI: 10.1007/978-1-4939-7201-2_14

25. Gong X., Liang Z., Yang Y. et al. A resazurin-based, nondestructive assay for monitoring cell proliferation during a scaffold-based 3D culture process. Regen Biomater 2020;7(3):271–81. DOI: 10.1093/rb/rbaa002