Advances in Molecular OncologyAdvances in Molecular OncologyУспехи молекулярной онкологии2313-805X2413-3787Publishing House ABV Press27310.17650/2313-805X-2020-7-2-39-46RESEARCH ARTICLESЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫЕ СТАТЬИInvestigation of the expression level of genes-markers of proliferative activity in the mucosa at normal and various pathologies of the colonИсследование уровня экспрессии генов-маркеров пролиферативной активности в слизистой оболочке толстой кишки при различной патологииhttps://orcid.org/0000-0003-2331-5753KulinichT. M.КулиничТ. М.
Russian Federation

86 Profsoyuznaya St., Moscow 117997

117997 Москва, ул. Профсоюзная, 86

https://orcid.org/0000-0003-2480-4145ZakharenkoM. V.ЗахаренкоМ. В.
Russian Federation

86 Profsoyuznaya St., Moscow 117997

Маргарита Владимировна Захаренко 

117997 Москва, ул. Профсоюзная, 86

zak-margarita@mail.ruDzhikiyaE. L.ДжикияЕ. Л.
Russian Federation

86 Profsoyuznaya St., Moscow 117997

117997 Москва, ул. Профсоюзная, 86

https://orcid.org/0000-0001-9268-3221SenchukovaA. L.СенчуковаА. Л.
Russian Federation

86 Profsoyuznaya St., Moscow 117997

117997 Москва, ул. Профсоюзная, 86

https://orcid.org/0000-0002-9057-6227StanoevichU. S.СтаноевичУ. С.
Russian Federation

86 Profsoyuznaya St., Moscow 117997

117997 Москва, ул. Профсоюзная, 86

GruninI. B.ГрунинИ. Б.
Russian Federation

86 Profsoyuznaya St., Moscow 117997

117997 Москва, ул. Профсоюзная, 86

https://orcid.org/0000-0003-1193-352XMelnikovaN. V.МельниковаН. В.
Russian Federation

86 Profsoyuznaya St., Moscow 117997

117997 Москва, ул. Профсоюзная, 86

https://orcid.org/0000-0001-7914-1882GoncharovS. V.ГончаровС. В.
Russian Federation

86 Profsoyuznaya St., Moscow 117997

117997 Москва, ул. Профсоюзная, 86

https://orcid.org/0000-0001-7567-8308KrashikhinaT. V.КрашихинаТ. В.
Russian Federation

86 Profsoyuznaya St., Moscow 117997

117997 Москва, ул. Профсоюзная, 86

https://orcid.org/0000-0002-5530-0591KudinovaE. A.КудиноваЕ. А.
Russian Federation

86 Profsoyuznaya St., Moscow 117997

117997 Москва, ул. Профсоюзная, 86

https://orcid.org/0000-0003-2401-5007BliznyukovO. P.БлизнюковО. П.
Russian Federation

86 Profsoyuznaya St., Moscow 117997

117997 Москва, ул. Профсоюзная, 86

https://orcid.org/0000-0001-8351-8152BozhenkoV. K.БоженкоВ. К.
Russian Federation

86 Profsoyuznaya St., Moscow 117997

117997 Москва, ул. Профсоюзная, 86

Russian Scientific Center of Roentgenoradiology, Ministry of Health of RussiaФГБУ «Российский научный центр рентгенорадиологии» Минздрава России150520207239460609202006092020Copyright ©; 2020, Kulinich T.M., Zakharenko M.V., Dzhikiya E.L., Senchukova A.L., Stanoevich U.S., Grunin I.B., Melnikova N.V., Goncharov S.V., Krashikhina T.V., Kudinova E.A., Bliznyukov O.P., Bozhenko V.K.Copyright ©; 2020, Кулинич Т.М., Захаренко М.В., Джикия Е.Л., Сенчукова А.Л., Станоевич У.С., Грунин И.Б., Мельникова Н.В., Гончаров С.В., Крашихина Т.В., Кудинова Е.А., Близнюков О.П., Боженко В.К.2020Kulinich T.M., Zakharenko M.V., Dzhikiya E.L., Senchukova A.L., Stanoevich U.S., Grunin I.B., Melnikova N.V., Goncharov S.V., Krashikhina T.V., Kudinova E.A., Bliznyukov O.P., Bozhenko V.K.Кулинич Т.М., Захаренко М.В., Джикия Е.Л., Сенчукова А.Л., Станоевич У.С., Грунин И.Б., Мельникова Н.В., Гончаров С.В., Крашихина Т.В., Кудинова Е.А., Близнюков О.П., Боженко В.К.https://creativecommons.org/licenses/by/4.0https://umo.abvpress.ru/jour/article/view/273

Background. The search for molecular markers of colon diseases allowing highly specific and sensitive identification and differentiation of pathological processes is a clinically important problem. Expression levels of genes responsible for proliferation can reflect the changes in the affected tissues. The study objective is to perform comparative analysis of molecular and genetic markers of proliferative activity in benign and malignant neoplasms of the colon. Materials and methods. Analysis of the changes in proliferation markers (CCND1, с-MYC, Ki-67, HER2neu, TERT) in adenocarcinoma of the colon (n = 259), resection margin (about 15–20 cm from the tumor lesion) (n = 251), unchanged colon mucosa from healthy donors (n = 247), polyps (n = 28), unchanged colon mucosa intestinal polyposis (10–15 cm from the polyp) (n = 75) was performed using RT-PCR. Results and conclusion. It was shown that morphologically unchanged tissue of intestinal mucosa in malignant tumors has significant differences from normal tissue of healthy donors. Significant differences in the level of expression of genes responsible for the processes of proliferation, с-MYC, CCND1, TERT were found in benign hyperproliferative diseases (polyps). Moreover, these changes were specific to the type of pathological process, which allows us to consider these genes as the most promising candidates in the development of a differential method for diagnosing colon diseases.

Введение. Поиск молекулярных маркеров диагностики заболеваний толстой кишки, способных с высокой чувствительностью и специфичностью выявлять и дифференцировать патологический процесс, является актуальной клинически важной задачей. Уровень экспрессии генов, ответственных за процессы пролиферации, может отражать картину изменений в тканях пораженного органа. Цель исследования – сравнительный анализ молекулярно-генетических маркеров пролиферативной активности при доброкачественных и злокачественных новообразованиях толстой кишки. Материалы и методы. Методом полимеразной цепной реакции в реальном времени проведен анализ изменений экспрессии маркеров пролиферации (CCND1, с-MYC, Ki-67, HER2neu, TERT) в следующих тканях: аденокарциномы толстой кишки (n = 259), края резекции (около 15–20 см от опухолевого узла) (n = 251), неизмененной слизистой оболочки толстой кишки здоровых доноров (n = 247), полипов (n = 28), неизмененной слизистой оболочки толстой кишки при полипах (10–15 см от полипа) (n = 75). Результаты и заключение. Установлено, что в тканях полипов толстой кишки наблюдаются достоверные различия в уровне экспрессии генов, ответственных за процессы пролиферации (с-MYC, CCND1, TERT). Выявленные различия специфичны для типа патологического процесса, что позволяет рассматривать данные гены в качестве наиболее перспективных кандидатов при разработке дифференциального метода диагностики заболеваний толстой кишки.

colorectal cancergene expressionmorphologically unchanged tissuecolon polypproliferation markerколоректальный ракэкспрессия геновморфологически неизмененная тканьполип толстой кишкимаркеры пролиферации1. Состояние онкологической помощи населению России в 2018 году. Под ред. А.Д. Каприна, В.В. Старинского, Г.В. Петровой. М.: МНИОИ им. П.А. Герцена – филиал ФГБУ «НМИЦ радиологии» Минздрава России, 2019. С. 18. [State of oncological care in Russia in 2018. Eds.: А.D. Kaprin, V.V. Starinskiy, G.V. Petrova. Moscow: MNIOI im. P.A. Gertsena – filial FGBU “NMITS radiologii” Minzdrava Rossii, 2019. Р. 18. (In Russ.)].Состояние онкологической помощи населению России в 2018 году. Под ред. А.Д. Каприна, В.В. Старинского, Г.В. Петровой. М.: МНИОИ им. П.А. Герцена – филиал ФГБУ «НМИЦ радиологии» Минздрава России, 2019. С. 18. [State of oncological care in Russia in 2018. Eds.: А.D. Kaprin, V.V. Starinskiy, G.V. Petrova. Moscow: MNIOI im. P.A. Gertsena – filial FGBU “NMITS radiologii” Minzdrava Rossii, 2019. Р. 18. (In Russ.)].2. Солодкий В.А., Чхиквадзе В.Д., Станоевич У.С. и др. Ранняя диагностика колоректального рака. Врач 2012;11:20–3. [Solodkiy V.A., Chkhivadze V.D., Stanoevich U.S. et al. Early diagnosis of colorectal cancer. Vrach = Doctor 2012;11:20–3. (In Russ.)].Солодкий В.А., Чхиквадзе В.Д., Станоевич У.С. и др. Ранняя диагностика колоректального рака. Врач 2012;11:20–3. [Solodkiy V.A., Chkhivadze V.D., Stanoevich U.S. et al. Early diagnosis of colorectal cancer. Vrach = Doctor 2012;11:20–3. (In Russ.)].3. Агейкина Н.В. Комбинированное эндоскопическое лечение малигнизированных полипов толстой кишки. Дис. ... канд. мед. наук. М., 2011. [Ageykina N.V. Combination endoscopic treatment of malignant colon polyps. PhD in Medicine dissertation. Moscow, 2011. (In Russ.)].Агейкина Н.В. Комбинированное эндоскопическое лечение малигнизированных полипов толстой кишки. Дис. ... канд. мед. наук. М., 2011. [Ageykina N.V. Combination endoscopic treatment of malignant colon polyps. PhD in Medicine dissertation. Moscow, 2011. (In Russ.)].4. Juárez М., Egoavil С., Rodríguez-Soler М. et al. KRAS and BRAF somatic mutations in colonic polyps and the risk of metachronous neoplasia. PLoS One 2017;12(9):e0184937. DOI: 10.1371/journal.pone.0184937.Juárez М., Egoavil С., Rodríguez-Soler М. et al. KRAS and BRAF somatic mutations in colonic polyps and the risk of metachronous neoplasia. PLoS One 2017;12(9):e0184937. DOI: 10.1371/journal.pone.0184937.5. Xue-Qi C., Jia-Yu M., Wen-Bin L. et al. Association between CYP24A1 polymorphisms and the risk of colonic polyps and colon cancer in a Chinese population. World J Gastroenterol 2017;23(28):5179–86. DOI: 10.3748/wjg.v23.i28.5179.Xue-Qi C., Jia-Yu M., Wen-Bin L. et al. Association between CYP24A1 polymorphisms and the risk of colonic polyps and colon cancer in a Chinese population. World J Gastroenterol 2017;23(28):5179–86. DOI: 10.3748/wjg.v23.i28.5179.6. Vandesompele J., De Preter K., Pattyn F. et al. Accurate normalization of real-time quantitative RT-PCR data by geometric averaging of multiple internal control genes. Genome Biology 2002;3(7): research0034. DOI: 10.1186/gb-2002-3-7-research0034.Vandesompele J., De Preter K., Pattyn F. et al. Accurate normalization of real-time quantitative RT-PCR data by geometric averaging of multiple internal control genes. Genome Biology 2002;3(7): research0034. DOI: 10.1186/gb-2002-3-7-research0034.7. Dowling S.M., Walsh D., Coffey D.S., Keely P.A. The importance of choosing the appropriate reference genes for quantitative real-time PCR, as shown using colon cancer cells and tissues. F1000 Res 2016;5:99. DOI: 10.12688/f1000research.7656.2.Dowling S.M., Walsh D., Coffey D.S., Keely P.A. The importance of choosing the appropriate reference genes for quantitative real-time PCR, as shown using colon cancer cells and tissues. F1000 Res 2016;5:99. DOI: 10.12688/f1000research.7656.2.8. Krzystek-Korpacka M., Diakowska D., Bania J., Gamian A. Expression stability of common housekeeping genes is differently affected by bowel inflammation and cancer: implications for finding suitable normalizers for inflammatory bowel disease studies. Inflamm Bowel Dis 2014;20(7):1147–56. DOI: 10.1097/MIB.0000000000000067.Krzystek-Korpacka M., Diakowska D., Bania J., Gamian A. Expression stability of common housekeeping genes is differently affected by bowel inflammation and cancer: implications for finding suitable normalizers for inflammatory bowel disease studies. Inflamm Bowel Dis 2014;20(7):1147–56. DOI: 10.1097/MIB.0000000000000067.9. De Kok J.B., Roelofs R.W., Giesendorf B.A. et al. Normalization of gene expression measurements in tumor tissues: comparison of 13 endogenous control genes. LabInvest 2005;85(1):154–9. DOI: 10.1038/labinvest.3700208.De Kok J.B., Roelofs R.W., Giesendorf B.A. et al. Normalization of gene expression measurements in tumor tissues: comparison of 13 endogenous control genes. LabInvest 2005;85(1):154–9. DOI: 10.1038/labinvest.3700208.10. Станоевич У.С., Захаренко М.В., Боженко В.К. и др. Роль молекулярных изменений в морфологически неизмененной слизистой оболочке толстой кишки при колоректальном раке. Гастроэнтерология Санкт-Петербурга 2018;2:99–99а. [Stanoevich U.S., Zakharenko M.V., Bozhenko V.K. et al. The role of molecular changes in morphologically unchanged colon mucosa in colorectal cancer. Gastroenterologiya Sankt-Peterburga = Saint Petersburg Gastroenterology 2018;2:99–a. (In Russ.)].Станоевич У.С., Захаренко М.В., Боженко В.К. и др. Роль молекулярных изменений в морфологически неизмененной слизистой оболочке толстой кишки при колоректальном раке. Гастроэнтерология Санкт-Петербурга 2018;2:99–99а. [Stanoevich U.S., Zakharenko M.V., Bozhenko V.K. et al. The role of molecular changes in morphologically unchanged colon mucosa in colorectal cancer. Gastroenterologiya Sankt-Peterburga = Saint Petersburg Gastroenterology 2018;2:99–a. (In Russ.)].11. Bujanda L., Cosme A., GilI. et al. Malignant colorectal polyps. World J Gastroenterol 2010;16(25):3103–11. DOI: 10.3748/wjg.v16.i25.3103.Bujanda L., Cosme A., GilI. et al. Malignant colorectal polyps. World J Gastroenterol 2010;16(25):3103–11. DOI: 10.3748/wjg.v16.i25.3103.12. Боженко В.К., Станоевич У.С., Троценко И.Д. и др. Сравнение экспрессии мРНК матриксных металлопротеиназ в морфологически нормальной, неопластической и метастатической тканях толстого кишечника и в биоптатах здоровых доноров. Биомедицинская химия 2018;64(1):46–52. [Bozhenko V.K., Stanoevich U.S., Trotsenko I.D. et al. Comparison of matrix proteinase mRNA expression in morphologically normal, neoplastic, and metastatic colon tissue and colon biopsies from healthy donors. Biomeditsinskaya khimiya = Biomedical Chemistry 2018;64(1):46–52. (In Russ.)].Боженко В.К., Станоевич У.С., Троценко И.Д. и др. Сравнение экспрессии мРНК матриксных металлопротеиназ в морфологически нормальной, неопластической и метастатической тканях толстого кишечника и в биоптатах здоровых доноров. Биомедицинская химия 2018;64(1):46–52. [Bozhenko V.K., Stanoevich U.S., Trotsenko I.D. et al. Comparison of matrix proteinase mRNA expression in morphologically normal, neoplastic, and metastatic colon tissue and colon biopsies from healthy donors. Biomeditsinskaya khimiya = Biomedical Chemistry 2018;64(1):46–52. (In Russ.)].13. Станоевич У.С., Боженко В.К., Захаренко М.В. и др. Роль молекулярно-генетических исследований в планировании неоадъювантной химиолучевой терапии при раке прямой кишки. Злокачественные опухоли 2016;4-S1(21):258–9. [Stanoevich U.S., Bozhenko V.K., Zakharenko M.V. et al. The role of molecular and genetic studies in planning of neoadjuvant chemoradiation therapy for rectal cancer. Zlokachestvennie opukholi = Malignant Tumors 2016;4-S1(21):258–9. (In Russ.)].Станоевич У.С., Боженко В.К., Захаренко М.В. и др. Роль молекулярно-генетических исследований в планировании неоадъювантной химиолучевой терапии при раке прямой кишки. Злокачественные опухоли 2016;4-S1(21):258–9. [Stanoevich U.S., Bozhenko V.K., Zakharenko M.V. et al. The role of molecular and genetic studies in planning of neoadjuvant chemoradiation therapy for rectal cancer. Zlokachestvennie opukholi = Malignant Tumors 2016;4-S1(21):258–9. (In Russ.)].14. Reimers M.S., Zeestraten E.C.M., Kuppen P.J.K. et al. Biomarkers in precision therapy in colorectal cancer. Gastroenterol Rep(Oxf) 2013;1(3):166–83. DOI: 10.1093/gastro/got022.Reimers M.S., Zeestraten E.C.M., Kuppen P.J.K. et al. Biomarkers in precision therapy in colorectal cancer. Gastroenterol Rep(Oxf) 2013;1(3):166–83. DOI: 10.1093/gastro/got022.15. Chen Y., Jiang J., Zhao M. et al. MicroRNA-374a suppresses colon cancer progression by directly reducing CCND1 to inactivate the PI3K/AKT pathway. Oncotarget 2016;7(27):41306–19. DOI: 10.18632/oncotarget.9320.Chen Y., Jiang J., Zhao M. et al. MicroRNA-374a suppresses colon cancer progression by directly reducing CCND1 to inactivate the PI3K/AKT pathway. Oncotarget 2016;7(27):41306–19. DOI: 10.18632/oncotarget.9320.16. Gaspar T.B., Sá A., Lopes J.M. et al. Telomere maintenance mechanisms in cancer. Genes(Basel) 2018;9(5):241. DOI: 10.3390/genes9050241.Gaspar T.B., Sá A., Lopes J.M. et al. Telomere maintenance mechanisms in cancer. Genes(Basel) 2018;9(5):241. DOI: 10.3390/genes9050241.17. Cordero D., Solé X., Crous-Bou M. et al. Large differences in global transcriptional regulatory programs of normal and tumor colon cells. BMC Cancer 2014;14:708. DOI: 10.1186/1471-2407-14-708.Cordero D., Solé X., Crous-Bou M. et al. Large differences in global transcriptional regulatory programs of normal and tumor colon cells. BMC Cancer 2014;14:708. DOI: 10.1186/1471-2407-14-708.18. Druliner B.R., Ruan X., Johnson R. et al. Time lapse to colorectal cancer: telomere dynamics define the malignant potential of polyps. Clin Transl Gastroenterol 2016;7(9):e188. DOI: 10.1038/ctg.2016.48.Druliner B.R., Ruan X., Johnson R. et al. Time lapse to colorectal cancer: telomere dynamics define the malignant potential of polyps. Clin Transl Gastroenterol 2016;7(9):e188. DOI: 10.1038/ctg.2016.48.19. Belt E.J.Th, Brosens R.P.M., Delisvan Diemen P.M. et al. Cell cycle proteins predict recurrence in stage II and III colon cancer. Ann Surg Oncol 2012;19 Suppl 3:S682–92. DOI: 10.1245/s10434-012-2216-7.Belt E.J.Th, Brosens R.P.M., Delisvan Diemen P.M. et al. Cell cycle proteins predict recurrence in stage II and III colon cancer. Ann Surg Oncol 2012;19 Suppl 3:S682–92. DOI: 10.1245/s10434-012-2216-7.20. Смолякова Р.М., Машевский А.А., Кохнюк В.Т. и др. Прогностическая значимость экспрессии маркеров опухолевой пролиферации Ki-67, P53 и BCL-2 у больных колоректальным раком и полипозом. Онкологический журнал 2008;1(5):29–39. [Smolyakova R.M., Mashevskiy A.A., Kokhnyuk V.T. et al. Prognostic significance of expression of Ki-67, P53 and BCL-2 tumor proliferation markers in patients with colorectal cancer and polyposis. Onkologicheskiy zhurnal = Oncological Journal 2008;1(5):29–39. (In Russ.)].Смолякова Р.М., Машевский А.А., Кохнюк В.Т. и др. Прогностическая значимость экспрессии маркеров опухолевой пролиферации Ki-67, P53 и BCL-2 у больных колоректальным раком и полипозом. Онкологический журнал 2008;1(5):29–39. [Smolyakova R.M., Mashevskiy A.A., Kokhnyuk V.T. et al. Prognostic significance of expression of Ki-67, P53 and BCL-2 tumor proliferation markers in patients with colorectal cancer and polyposis. Onkologicheskiy zhurnal = Oncological Journal 2008;1(5):29–39. (In Russ.)].21. Харлова О.А., Олейникова Н.А., Мальков П.Г., Данилова Н.В. Новые подходы в классификации зубчатых образований толстой кишки. Современные проблемы науки и образования 2018;2:24. [Kharlova O.A., Oleynikova N.A., Malkov P.G., Danilova N.V. New approaches to the classification of colon serrated lesions. Sovremennye problemy nauki i obrazovaniya = Modern Problems of Science and Education 2018;2:24. (In Russ.)].Харлова О.А., Олейникова Н.А., Мальков П.Г., Данилова Н.В. Новые подходы в классификации зубчатых образований толстой кишки. Современные проблемы науки и образования 2018;2:24. [Kharlova O.A., Oleynikova N.A., Malkov P.G., Danilova N.V. New approaches to the classification of colon serrated lesions. Sovremennye problemy nauki i obrazovaniya = Modern Problems of Science and Education 2018;2:24. (In Russ.)].22. Dang C.V. MYC on the path to cancer. Cell 2012;149(1):22–35. DOI: 10.1016/j.cell.2012.03.003.Dang C.V. MYC on the path to cancer. Cell 2012;149(1):22–35. DOI: 10.1016/j.cell.2012.03.003.23. Liu S., Tackmann N.R., Yang J. et al. Disruption of the RP-MDM2-p53 pathway accelerates APC loss-induced colorectal tumorigenesis. Oncogene 2017;36(10):1374–83. DOI: 10.1038/onc.2016.301.Liu S., Tackmann N.R., Yang J. et al. Disruption of the RP-MDM2-p53 pathway accelerates APC loss-induced colorectal tumorigenesis. Oncogene 2017;36(10):1374–83. DOI: 10.1038/onc.2016.301.24. Gabay M., Li Y., Felsher D.W. MYC activation is a hallmark of cancer initiation and maintenance. Cold Spring Harb Perspect Med 2014;4(6):a014241. DOI: 10.1101/cshperspect.a014241.Gabay M., Li Y., Felsher D.W. MYC activation is a hallmark of cancer initiation and maintenance. Cold Spring Harb Perspect Med 2014;4(6):a014241. DOI: 10.1101/cshperspect.a014241.25. Cascon A., Robledo M. MAX and MYC: a heritable breakup. Cancer Res 2012;72(13):3119–24. DOI: 10.1158/0008-5472.CAN-11-3891.Cascon A., Robledo M. MAX and MYC: a heritable breakup. Cancer Res 2012;72(13):3119–24. DOI: 10.1158/0008-5472.CAN-11-3891.26. Wolfer A., Ramaswamy S. MYC and metastasis. Cancer Res 2011;71(6):2034–7. DOI: 10.1158/0008-5472.can-10-3776.Wolfer A., Ramaswamy S. MYC and metastasis. Cancer Res 2011;71(6):2034–7. DOI: 10.1158/0008-5472.can-10-3776.27. Melnik S., Werth N., Boeuf S. et al. Impact of c-MYC expression on proliferation, differentiation, and risk of neoplastic transformation of human mesenchymal stromal cells. Stem Cell Res Ther 2019;10(1):73. DOI: 10.1186/s13287-019-1187-z .Melnik S., Werth N., Boeuf S. et al. Impact of c-MYC expression on proliferation, differentiation, and risk of neoplastic transformation of human mesenchymal stromal cells. Stem Cell Res Ther 2019;10(1):73. DOI: 10.1186/s13287-019-1187-z .28. Stewart J., Evan G., Watson J. et al. Detection of the c-MYC oncogene product in colonic polyps and carcinomas. Br J Cancer 1986;53(1):1–6.Stewart J., Evan G., Watson J. et al. Detection of the c-MYC oncogene product in colonic polyps and carcinomas. Br J Cancer 1986;53(1):1–6.29. Egeblad M., Nakasone E.S., Werb Z. Tumors as organs: complex tissues that interface with the entire organism. Dev Cell 2010;18:884–901. DOI: 10.1016/j.devcel.2010.05.012.Egeblad M., Nakasone E.S., Werb Z. Tumors as organs: complex tissues that interface with the entire organism. Dev Cell 2010;18:884–901. DOI: 10.1016/j.devcel.2010.05.012.30. Graham K., de las Morenas A., Tripathi A. et al. Gene expression in histologically normal epithelium from breast cancer patients and from cancerfree prophylactic mastectomy patients shares a similar profile. Br J Cancer 2010;102(8):1284–93. DOI: 10.1038/sj.bjc.6605576.Graham K., de las Morenas A., Tripathi A. et al. Gene expression in histologically normal epithelium from breast cancer patients and from cancerfree prophylactic mastectomy patients shares a similar profile. Br J Cancer 2010;102(8):1284–93. DOI: 10.1038/sj.bjc.6605576.31. Ayiomamitis G.D., Notas G., Zaravinos A. et al. Differences in telomerase activity between colon and rectal cancer. Canad J Surg 2014;57(3):199–208. DOI: 10.1503/cjs.031312.Ayiomamitis G.D., Notas G., Zaravinos A. et al. Differences in telomerase activity between colon and rectal cancer. Canad J Surg 2014;57(3):199–208. DOI: 10.1503/cjs.031312.32. Nowak J., Januszkiewicz D., Lewandowski K. et al. Activity and expression of human telomerase in normal and malignant cells in gastric and colon cancer patients. Eur J Gastroenterol Hepatol 2003;15:75–80. DOI:10.1097/00042737-200301000-00013.Nowak J., Januszkiewicz D., Lewandowski K. et al. Activity and expression of human telomerase in normal and malignant cells in gastric and colon cancer patients. Eur J Gastroenterol Hepatol 2003;15:75–80. DOI:10.1097/00042737-200301000-00013.33. Aran D., Camarda R., Odegaard J. et al. Comprehensive analysis of normal adjacent to tumor transcriptomes. Nat Commun 2017;8:1077. DOI: 10.1038/s41467-017-01027-z.Aran D., Camarda R., Odegaard J. et al. Comprehensive analysis of normal adjacent to tumor transcriptomes. Nat Commun 2017;8:1077. DOI: 10.1038/s41467-017-01027-z.34. Sanz-Pamplona R., Berenguer A., Cordero D. Aberrant gene expression in mucosa adjacent to tumor reveals a molecular crosstalk in colon cancer. Mol Cancer 2014;13:46. DOI: 10.1186/1476-4598-13-46.Sanz-Pamplona R., Berenguer A., Cordero D. Aberrant gene expression in mucosa adjacent to tumor reveals a molecular crosstalk in colon cancer. Mol Cancer 2014;13:46. DOI: 10.1186/1476-4598-13-46.