Advances in Molecular OncologyAdvances in Molecular OncologyУспехи молекулярной онкологии2313-805X2413-3787Publishing House ABV Press57410.17650/2313-805X-2023-10-3-90-97RESEARCH ARTICLESЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫЕ СТАТЬИPrognostic fine needle aspiration biopsy of uveal melanoma: Molecular and genetic factors of metastasis riskПрогностическая тонкоигольная аспирационная биопсия увеальной меланомы: молекулярно-генетические факторы риска развития метастазовhttps://orcid.org/0000-0001-8937-7450YarovayaV. A.ЯроваяВ. А.
Russian Federation

59a Beskudnikovsky Boulevard, Moscow 127486

127486 Москва, Бескудниковский бульвар, 59а

verandreevna@gmail.comhttps://orcid.org/0000-0001-6949-1002LevashovI. A.ЛевашовИ. А.
Russian Federation

59a Beskudnikovsky Boulevard, Moscow 127486

127486 Москва, Бескудниковский бульвар, 59а

https://orcid.org/0000-0002-7778-6617ZaretskyA. R.ЗарецкийА. Р.
Russian Federation

1 Ostrovityanova St., Moscow 117997

117997 Москва, ул. Островитянова, 1

https://orcid.org/0000-0002-8592-1188ChudakovaL. V.ЧудаковаЛ. В.
Russian Federation

1 Ostrovityanova St., Moscow 117997

117997 Москва, ул. Островитянова, 1

https://orcid.org/0000-0003-0532-6061NazarovaV. V.НазароваВ. В.
Russian Federation

24 Kashirskoye Shosse, Moscow 115522

115522 Москва, Каширское шоссе, 23

https://orcid.org/0000-0001-7543-619XMatyaevaA. D.МатяеваА. Д.
Russian Federation

59a Beskudnikovsky Boulevard, Moscow 127486

127486 Москва, Бескудниковский бульвар, 59а

https://orcid.org/0000-0002-8562-6082DemidovL. V.ДемидовЛ. В.
Russian Federation

24 Kashirskoye Shosse, Moscow 115522

115522 Москва, Каширское шоссе, 23

https://orcid.org/0000-0003-2219-7054YarovoyA. A.ЯровойА. А.
Russian Federation

59a Beskudnikovsky Boulevard, Moscow 127486

127486 Москва, Бескудниковский бульвар, 59а

S. Fyodorov Eye Microsurgery Federal State Institution, Ministry of Health of RussiaФГАУ «Национальный медицинский исследовательский центр «Межотраслевой научно-технический комплекс «Микрохирургия глаза» им. акад. С. Н. Федорова» Минздрава РоссииPirogov Russian National Research Medical University, Ministry of Health of RussiaФГАОУ ВО «Российский национальный исследовательский медицинский университет им. Н. И. Пирогова» Минздрава РоссииN.N. Blokhin National Medical Russian Research Center of Oncology, Ministry of Health of RussiaФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр онкологии им. Н. Н. Блохина» Минздрава России15092023103909710102023Copyright ©; 2023, Yarovaya V.A., Levashov I.A., Zaretsky A.R., Chudakova L.V., Nazarova V.V., Matyaeva A.D., Demidov L.V., Yarovoy A.A.Copyright ©; 2023, Яровая В.А., Левашов И.А., Зарецкий А.Р., Чудакова Л.В., Назарова В.В., Матяева А.Д., Демидов Л.В., Яровой А.А.2023Yarovaya V.A., Levashov I.A., Zaretsky A.R., Chudakova L.V., Nazarova V.V., Matyaeva A.D., Demidov L.V., Yarovoy A.A.Яровая В.А., Левашов И.А., Зарецкий А.Р., Чудакова Л.В., Назарова В.В., Матяева А.Д., Демидов Л.В., Яровой А.А.https://creativecommons.org/licenses/by/4.0https://umo.abvpress.ru/jour/article/view/574

Introduction. Molecular genetic testing is actively used for prognostication in patients with uveal melanoma (UM). Tissue for genetic analysis may be obtained either by surgical excision or through fine-needle aspiration biopsy (FNAB). Performing genetic testing and FNAB in each institution can differ in surgical techniques and laboratory methodologies.

Aim. To present our own experience of performing FNAB-based molecular genetic testing for prognostication in patients with uveal melanoma.

Materials and methods. Prognostic FNAB (n = 151) were combined with brachytherapy or stereotactic surgery. Genetic testing was performed by methods based on polymerase chain reaction (GNAQ, GNA11, EIF1AX and SF3B1 mutations) and fluorescence in situ hybridization (copy numbers of PPARG and MYC genes); cytology of FNAB material was also assessed.

Results. Fine-needle aspiration biopsy material was informative in 91 % of cases. At the median follow-up of 36 months, 12 cases of distant metastases were detected. Occurrence of the assessed mutations and copy numbers were related to other representative studies. PPARG deletion was shown to be a significant prognostic factor for metastasis-free survival (p <0,01), which was demonstrated for the first time; EIF1AX and SF3B1 mutations, MYC amplification and cytological class were not shown to be significantly associated with survival in our study.

Conclusion. FNAB-based molecular genetic testing for prognostication in patients with uveal melanoma was shown to be a reliable and highly informative approach. Some of the prognostic factors need to be evaluated further with longer follow-up.

Введение. Для определения прогноза заболевания при увеальной меланоме активно используются молекулярно-генетические методы исследования материала первичной опухоли, который может быть получен в рамках органосохраняющего лечения с помощью тонкоигольной аспирационной биопсии (ТИАБ). Молекулярно-генетическое тестирование и ТИАБ в отечественной практике имеют ряд особенностей, связанных с хирургической техникой, методикой молекулярно-генетического тестирования и классификационными подходами.

Цель – представить собственный опыт применения молекулярно-генетических методов в прогнозировании риска развития метастазов у пациентов с увеальной меланомой на основе материала ТИАБ.

Материалы и методы. Был проанализирован материал ТИАБ, полученный от 151 пациента. Тонкоигольную аспирационную биопсию с прогностической целью выполняли одновременно с органосохраняющим лечением (брахитерапией или стереотаксической радиохирургией). В ходе молекулярно-генетического исследования осуществляли анализ мутаций в генах GNAQ, GNA11, EIF1AX и SF3B1 (методами высокочувствительной мутационно-специфической полимеразной цепной реакции в реальном времени и полимеразной цепной реакции с последующим секвенированием продуктов этой реакции по Сэнгеру) и количества копий генов PPARG и MYC (методом флуоресцентной гибридизации in situ). Также проводили цитологическое исследование всех образцов, полученных при ТИАБ.

Результаты. Уровень информативности материала ТИАБ составил 91 %, медиана срока наблюдения – 36 мес. За этот период отдаленные метастазы выявлены у 12 пациентов из 151. Частота встречаемости молекулярно-генетических нарушений в целом соотносится с данными других крупных исследований. Оригинальная прогностическая панель впервые продемонстрировала возможность определения прогноза пациента в зависимости от делеции гена PPARG, наличие которой ассоциировано с низкими показателями выживаемости (p <0,01). Мутации в генах EIF1AX и SF3B1, амплификация гена MYC и клеточный тип опухоли по результатам цитологического исследования не продемонстрировали статистической значимости.

Заключение. Использованные нами у пациентов с увеальной меланомой технологии ТИАБ и молекулярно-генетического тестирования продемонстрировали надежность и высокую информативность. Ряд прогностических факторов требуют дальнейшего исследования с более длительными сроками наблюдения за пациентами.

ocular oncologymolecular oncologyuveal melanomaprognosticationsurvivalофтальмоонкологиямолекулярная онкологияувеальная меланомапрогнозированиевыживаемостьThe study was conducted with the support of the Ministry of Health of the Russian Federation (state task No. 300060056 for the Pirogov Russian National Research Medical University of the Ministry of Health of Russia).Исследование проведено при поддержке Минздрава России (государственное задание № 300060056 для ФГАОУ ВО «Российский национальный исследовательский медицинский университет им. Н.И. Пирогова» Минздрава России).Hoiom V., Helgadottir H. The genetics of uveal melanoma: current in sights. Appl Clin Genet 2016;9:147–55. DOI: 10.2147/TACG.S69210Olopade O.I., Pichert G. Cancer genetics in oncology practice. Ann Oncol 2001;12(7):895–908. DOI: 10.2147/TACG.S69210Chattopadhyay C., Kim D.W., Gombos D.S. et al. Uveal melanoma: from diagnosis to treatment and the science in between. Cancer 2016;122(15):2299–312. DOI: 10.2147/TACG.S69210Royer-Bertrand B., Torsello M., Rimoldi D. et al. Comprehensive Genetic landscape of uveal melanoma by whole-genome sequencing. Am J Hum Genet 2016;99(5):1190–8. DOI: 10.1016/j.ajhg.2016.09.008Jager M.J., Shields C.L., Cebulla C.M. et al. Uveal melanoma. Nat Rev Dis Prim 2020;6(1):24. DOI: 10.1038/s41572-020-0158-0Egger E., Zografos L., Schalenbourg A. et al. Eye retention after proton beam radiotherapy for uveal melanoma. Int J Radiat Oncol 2003;55(4):867–80. DOI: 10.1016/S0360-3016(02)04200-1Shields C.L., Shields J.A., Perez N. et al. Primary transpupillary thermotherapy for small choroidal melanoma in 256 consecutive cases: outcomes and limitations. Ophthalmology 2002;109(2):225– 34. DOI: 10.1016/S0161-6420(01)00902-2Kaliki S., Shields C., Shields J. Uveal melanoma: estimating prognosis. Indian J Ophthalmol 2015;63(2):93. DOI: 10.4103/0301-4738.154367Radivoyevitch T., Zabor E.C., Singh A.D. Uveal melanoma: longterm survival. PLoS One 202;16(5):e0250939. DOI: 10.1371/journal.pone.0250939Singh A.D., Zabor E.C., Radivoyevitch T. Estimating сured fractions of uveal melanoma. JAMA Ophthalmol 202;139(2):174–81. DOI: 10.1001/jamaophthalmol.2020.5720Shain A.H., Bagger M.M., Yu R. et al. The genetic evolution of metastatic uveal melanoma. Nat Genet 2019;51(7):1123–30. DOI: 10.1038/s41588-019-0440-9Shields C.L., Ganguly A., Bianciotto C.G. et al. Prognosis of uveal melanoma in 500 cases using genetic testing of fine-needle aspiration biopsy specimens. Ophthalmology 2011;118(2):396–401. DOI: 10.1016/j.ophtha.2010.05.023Zaretsky A.R., Yarovaya V.A., Chudakova L.V. et al. Experience of molecular testing of stage I–III uveal melanoma in conservative and surgical treatment. Voprosy onkologii = Questions of Oncology 2018;5:625–32. (In Russ.).Зарецкий А.Р., Яровая В.А., Чудакова Л.В. и др. Опыт молекулярного тестирования увеальной меланомы I–III стадии при консервативном и хирургическом лечении. Вопросы онкологии 2018;5:625–32.Dogrusöz M., Jager M.J. Genetic prognostication in uveal melanoma. Acta Ophthalmol 2018;96(4):331–47. DOI: 10.1111/aos.13580Onken M.D., Worley L.A., Char D.H. et al. Collaborative Ocular Oncology Group report number 1: prospective validation of a multigene prognostic assay in uveal melanoma. Ophthalmology 2012;8(119):1596–603. DOI: 10.1016/j.ophtha.2012.02.017Jager M.J., Brouwer N.J., Esmaeli B. The cancer genome atlas project: an integrated molecular view of uveal melanoma. Ophthalmology 2018;125(8):1139–42. DOI: 10.1016/j.ophtha.2018.03.011Robertson A.G., Shih J., Yau C. et al. Integrative analysis identifies four molecular and clinical subsets in uveal melanoma. Cancer Cell 2017;32(2):204–20.e15. DOI: 10.1016/j.ccell.2017.07.003McCannel T.A., Chang M.Y., Burgess B.L. Multi-Year follow-up of fine-needle aspiration biopsy in choroidal melanoma. Ophthalmology 2012;119(3):606–10. DOI: 10.1016/j.ophtha.2011.08.046Yarovaya V.A., Yarovoy A.A., Korobov E.N. et al. Molecular testing of uveal melanoma. Nahodki. Sovremennye tekhnologii v oftal’mologii = Finds. Modern technologies in ophthalmology. 2018;(4):297–9. (In Russ.).Яровая В.А., Яровой А.А., Коробов Е.Н. и др. Молекулярное тестирование увеальной меланомы. Находки. Современные технологии в офтальмологии 2018;(4):297–9.Levashov I.A., Yarovoy A.A., Yarovaya V.A. et al. Assessment of the risk of metastasis during the “prognostic” fine needle aspiration biopsy of uveal melanoma. Zlokachestvennye opuholi = Malignant tumors 2022;12(2):29–35. (In Russ.). DOI: 10.18027/2224-50572022-12-2-29-35Левашов И.А., Яровой А.А., Яровая В.А. и др. Оценка риска метастазирования при проведении «прогностической» тонкоигольной аспирационной биопсии увеальной меланомы. Злокачественные опухоли 2022;12(2):29–35. DOI: 10.18027/22245057-2022-12-2-29-35Dogrusöz M., Jager M.J. Genetic prognostication in uveal melanoma. Acta Ophthalmol 2018;96(4):331–47. DOI: 10.1111/aos.13580Sellam A., Desjardins L., Barnhill R. et al. Fine needle aspiration biopsy in uveal melanoma: technique, complications, and outcomes. Am J Ophthalmol 2016;162:28–34.e1. DOI: 10.1016/j.ajo.2015.11.005Singh A.D., Medina C.A., Singh N. et al. Fine-needle aspiration biopsy of uveal melanoma: outcomes and complications. Br J Ophthalmol 2016;100(4):456–62. DOI: 10.1136/bjophthalmol-2015-306921Yarovaya V.A., Shatskikh A.V., Zaretsky A.R. et al. Prognostic value of the cell type of uveal melanoma. Arhiv patologii = Pathology archive 2021;83(4):14. (In Russ.). DOI: 10.17116/patol20218304114Яровая В.А., Шацких А.В., Зарецкий А.Р. и др. Прогностическое значение клеточного типа увеальной меланомы. Архив патологии 2021;83(4):14. DOI: 10.17116/patol20218304114Finn A.P., Materin M.A., Mruthyunjaya Р. Choroidal tumor biopsy: a review of the current state and a glance into future techniques. Retina 2018;38(1):S79–87. DOI: 10.1097/IAE.0000000000001997Augsburger J.J., Corrêa Z.M., Schneider S. et al. Diagnostic transvitreal fine-needle aspiration biopsy of small melanocytic choroidal tumors in nevus versus melanoma category. Trans Am Ophthalmol Soc 2002;100:225–32.Cohen V.M.L., Dinakaran S., Parsons M.A. et al. Transvitreal fine needle aspiration biopsy: the influence of intraocular lesion size on diagnostic biopsy result. Eye 2001;15(2):143–7. DOI: 10.1038/eye.2001.48Yavuzyigitoglu S., Koopmans A.E., Verdijk R.M. et al. Uveal melanomas with SF3B1 mutations. Ophthalmology 2016;123(5):1118–28. DOI: 10.1016/j.ophtha.2016.01.023Parrella P., Caballero O.L., Sidransky D. et al. Detection of c-myc amplification in uveal melanoma by fluorescent in situ hybridization. Invest Ophthalmol Vis Sci 2001;42(8):1679–84. PMID 11431428Souri Z., Wierenga A.P.A., van Weeghel C. et al. Loss of BAP1 is associated with upregulation of the NFkB Pathway and Increased HLA class i expression in uveal melanoma. Cancers (Basel) 2019;11(8):1102. DOI: 10.3390/cancers11081102Shoushtari A.N., Carvajal R.D. GNAQ and GNA11 mutations in uveal melanoma. Melanoma Res 2014;24(6):525–34. DOI: 10.1097/CMR.0000000000000121Paul E.V., Parnell B.L., Fraker M. Prognosis of malignant melanomas of the choroid and ciliary body. Int Ophthalmol Clin 1962;2(2):387–402. DOI: 10.1097/00004397-19620600000007Callender Colonel G.R., Wilder H.C., Ash J.E. Five hundred melanomas of the choroid and ciliary body followed five years or longer. Am J Ophthalmol 1942;25(8):962–7. DOI: 10.1016/S00029394(42)90595-6Sidawy M.K., Del Vecchio D.M., Knoll S.M. Fine-needle aspiration of thyroid nodules. Cancer 1997;25;81(4):253–9. DOI: 10.1002/(SICI)1097-0142De Lange M.J., Nell R.J., van der Velden P.A. Scientific and clinical implications of genetic and cellular heterogeneity in uveal melanoma. Mol Biomed 2021;2(1):25. DOI: 10.1186/s43556-02100048-xChar D.H., Kroll S.M., Miller T. et al. Irradiated uveal melanomas: cytopathologic correlation with prognosis. Am J Ophthalmol 1996;122(4):509–13. DOI: 10.1016/S0002-9394(14)72110-5