Introduction. Loss of membrane expression of the epithelial adhesion glycoprotein EpCAM, the primary marker of circulating tumor cells (CTCs), is often associated with epithelial-mesenchymal transition, which facilitates tumor dissemination. Distinguishing phenotypic variants of tumor cells lacking membrane EpCAM expression in both blood and disseminated tumor cells (DTC) in bone marrow will enable the identification of cells capable of intra- and extravasation, i. e. the identification of populations with metastatic potential.
Aim. To determine the presence and ratio of tumor cells with membrane (mEpCAM) and intracellular (icEpCAM) localization and the degree of EpCAM expression (low and high) among CTCs and DTCs in breast cancer.
Materials and methods. The study involved CTCs and DTCs from breast cancer patients. Phenotyping was performed by flow cytometry using antibodies to CD45, EpCAM and pan-cytokeratin. EpCAM expression was analyzed based on localization (membrane/intracellular) and expression level (low/high).
Results. Cells lacking membrane EpCAM expression predominate among CTCs, whereas they were virtually undetectable in bone marrow. Not all CTC phenotypes are present in DTCs, which may be explained by cell selection during extravasation or cellular plasticity. Notably, unlike in primary tumors, CTCs and DTCs completely lack cells co-expressing membrane and intracellular EpCAM.
Conclusion. This study suggests the potential for intra- and extravasation of CTCs with different EpCAM expression patterns. However, their ability to form clinically detectable metastases requires further study.
Введение. Потеря мембранной экспрессии гликопротеина адгезии эпителия EpCAM – основного маркера циркулирующих опухолевых клеток (ЦОК) – зачастую ассоциирована с эпителиально-мезенхимальным переходом, который способствует опухолевой диссеминации. Различия фенотипических вариантов опухолевых клеток без экспрессии мембранного EрСАМ как среди ЦОК в крови, так и среди диссеминированных опухолевых клеток (ДОК) в костном мозге позволят идентифицировать клетки, способные к интра- и экстравазации, т. е. выявить популяции, обладающие метастатическим потенциалом.
Цель исследования – определить наличие и соотношение в ЦОК и ДОК клеток опухоли с мембранной (mEpCAM) и внутриклеточной (icEpCAM) локализацией и выраженностью экспрессии EpCAM (низкой и высокой) при раке молочной железы.
Материалы и методы. Объектом исследования были ЦОК и ДОК пациенток с раком молочной железы. Фенотипирование проводили методом проточной цитофлуориметрии с использованием антител к CD45, EpCAM и пан-цитокератину. Экспрессию EpCAM анализировали с учетом локализации (мембранная/внутриклеточная) и уровня экспрессии (низкий/высокий).
Результаты. Клетки с отсутствием мембранной экспрессии EpCAM преобладали среди ЦОК, тогда как в костном мозге они практически не обнаруживались. Не все фенотипы ЦОК присутствовали в ДОК, что может объясняться селекцией клеток на этапе экстравазации или клеточной пластичностью. Примечательно, что в отличие от первичной опухоли, в ЦОК и ДОК полностью отсутствовали клетки с коэкспрессией мембранного и внутриклеточного EpCAM.
Заключение. Таким образом, можно сделать вывод о потенциале ЦОК к интра- и экстравазации с различными вариантами экспрессии EpCAM. Однако их способность формировать клинически выявляемые метастазы требует дальнейшего изучения.