Advances in Molecular OncologyAdvances in Molecular OncologyУспехи молекулярной онкологии2313-805X2413-3787Publishing House ABV Press81910.17650/2313-805X-2025-12-3-100-115RESEARCH ARTICLESЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫЕ СТАТЬИExperimental testing of chemoresistance of ovarian cancer tumor cellsЭкспериментальное тестирование химиорезистентности опухолевых клеток рака яичниковhttps://orcid.org/0000-0001-8474-8195KuzinK. A.КузинК. А.
Russian Federation

Konstantin Alexandrovich Kuzin

24 Kashirskoe Shosse, Moscow 115522, Russia

Константин Александрович Кузин 

Россия, 115522 Москва, Каширское шоссе, 24

kuzin_konstantin@mail.ruhttps://orcid.org/0000-0002-5082-9883FetisovT. I.ФетисовТ. И.
Russian Federation

24 Kashirskoe Shosse, Moscow 115522, Russia; 6 Miklukho-Maklaya St., Moscow 117198, Russia

Россия, 115522 Москва, Каширское шоссе, 24; Россия, 117198 Москва, ул. Миклухо-Маклая, 6

https://orcid.org/0000-0002-1498-849XVlasovaO. A.ВласоваО. А.
Russian Federation

24 Kashirskoe Shosse, Moscow 115522, Russia

Россия, 115522 Москва, Каширское шоссе, 24

https://orcid.org/0000-0002-6341-0897KnyazevR. I.КнязевР. И.
Russian Federation

24 Kashirskoe Shosse, Moscow 115522, Russia; 2/1 Barricadnaya St., 123995 Moscow, Russia

Россия, 115522 Москва, Каширское шоссе, 24; Россия, 123995 Москва, ул. Баррикадная, 2/1

AntoshinaE. E.АнтошинаЕ. Е.
Russian Federation

24 Kashirskoe Shosse, Moscow 115522, Russia

Россия, 115522 Москва, Каширское шоссе, 24

TrukhanovaL. S.ТрухановаЛ. С.
Russian Federation

24 Kashirskoe Shosse, Moscow 115522, Russia

Россия, 115522 Москва, Каширское шоссе, 24

Gor’kovaT. G.ГорьковаТ. Г.
Russian Federation

24 Kashirskoe Shosse, Moscow 115522, Russia

Россия, 115522 Москва, Каширское шоссе, 24

https://orcid.org/0000-0002-3167-7204BelitskyG. A.БелицкийГ. А.
Russian Federation

24 Kashirskoe Shosse, Moscow 115522, Russia

Россия, 115522 Москва, Каширское шоссе, 24

https://orcid.org/0000-0002-9710-8178YakubovskayaM. G.ЯкубовскаяМ. Г.
Russian Federation

24 Kashirskoe Shosse, Moscow 115522, Russia; 6 Miklukho-Maklaya St., Moscow 117198, Russia

Россия, 115522 Москва, Каширское шоссе, 24; Россия, 117198 Москва, ул. Миклухо-Маклая, 6

https://orcid.org/0000-0002-8599-6833KirsanovK. I.КирсановК. И.
Russian Federation

24 Kashirskoe Shosse, Moscow 115522, Russia; 6 Miklukho-Maklaya St., Moscow 117198, Russia

Россия, 115522 Москва, Каширское шоссе, 24; Россия, 117198 Москва, ул. Миклухо-Маклая, 6

N.N. Blokhin National Medical Research Center of Oncology, Ministry of Health of RussiaФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр онкологии им. Н.Н. Блохина» Минздрава РоссииPeoples’ Friendship University of RussiaФГАОУ ВО «Российский университет дружбы народов»Russian Medical Academy of Continuing Professional Education, Ministry of Health of RussiaФГБОУ ДПО «Российская медицинская академия непрерывного профессионального образования» Минздрава России061020251231001151110202511102025Copyright ©; 2025, Kuzin K.A., Fetisov T.I., Vlasova O.A., Knyazev R.I., Antoshina E.E., Trukhanova L.S., Gor’kova T.G., Belitsky G.A., Yakubovskaya M.G., Kirsanov K.I.Copyright ©; 2025, Кузин К.А., Фетисов Т.И., Власова О.А., Князев Р.И., Антошина Е.Е., Труханова Л.С., Горькова Т.Г., Белицкий Г.А., Якубовская М.Г., Кирсанов К.И.2025Kuzin K.A., Fetisov T.I., Vlasova O.A., Knyazev R.I., Antoshina E.E., Trukhanova L.S., Gor’kova T.G., Belitsky G.A., Yakubovskaya M.G., Kirsanov K.I.Кузин К.А., Фетисов Т.И., Власова О.А., Князев Р.И., Антошина Е.Е., Труханова Л.С., Горькова Т.Г., Белицкий Г.А., Якубовская М.Г., Кирсанов К.И.https://creativecommons.org/licenses/by/4.0https://umo.abvpress.ru/jour/article/view/819

One of the most challenging issues in the treatment of ovarian cancer is the high level of tumor cell chemoresistance, which leads to early tumor recurrence and low overall survival. In the case of tumor cell chemoresistance, the therapy is ineffective, resulting in unnecessary drug consumption and harm to the patient due to toxic side effects and time losses during its implementation. One approach to solving this problem is experimental predictive testing of tumor cell chemoresistance in vitro.Aim. To develop a protocol of experimental testing of chemoresistance of ovarian cancer cells to chemotherapy drugs. We analyzed changes in the number of viable cells of A-1847, Ovcar-3 and Ovcar-4 cell lines cultured in hypo-adhesive conditions and optimized a method of cell viability determination based on resazurin metabolism. It was shown that viability of ovarian cancer cells of the studied cell lines is approximately the same in the presence of 1st and 2nd line antitumor drugs measured in accordance with the developed culture protocol in hypo-adhesive conditions and using ATP-tumor chemosensitivity assay (ATP-TCA) (DCS Innovative Diagnostik-Systeme, Germany) approved for use in clinical practice. The developed method is based on readily available and inexpensive reagents and expendables which makes it economically attractive.

Одной из наиболее сложных проблем в лечении больных раком яичников является высокий уровень химиорезистентности опухолевых клеток, что обусловливает раннее развитие рецидива заболевания и низкие показатели общей выживаемости. В случае химиорезистентности терапия оказывается неэффективной, вызывает неоправданный расход лекарственных препаратов, наносит ущерб пациенту из-за развития побочных токсических эффектов и временных потерь на ее проведение. Одним из подходов к решению этой проблемы является экспериментальное предиктивное тестирование химиорезистентности опухолевых клеток in vitro.Цель исследования – разработка протокола экспериментального тестирования химиорезистентности клеток рака яичников к химиотерапевтическим препаратам.Мы проанализировали изменение количества жизнеспособных клеток линий A-1847, Ovcar-3 и Ovcar-4 при их культивировании в гипоадгезионных условиях и оптимизировали метод определения жизнеспособности клеток по метаболизму резазурина. Выявлено, что жизнеспособность клеток рака яичников исследуемых линий в присутствии препаратов 1-й и 2-й линий противоопухолевой терапии, измеренная в соответствии с разработанным протоколом культивирования в гипоадгезионных условиях с использованием набора ATP-tumor chemosensitivity assay (ATP-TCA) (DCS Innovative Diagnostik-Systeme, Германия), одобренного для применения в клинической практике в Германии, находится примерно на одном уровене. Разработанная методика основана на использовании доступных и недорогих реагентов и расходных материалов, что делает ее экономически привлекательной. 

ovarian cancerresistanceindividual resistance to chemotherapy testovarian cancer cell linesresazurin cell viability assayрак яичниковрезистентностьтест на индивидуальную резистентность к химиотерапиилинии опухолевых клеток рака яичниковрезазуриновый тест на жизнеспособность клетокMalignant neoplasms in Russia in 2023 (morbidity and mortality). Ed. by A.D. Kaprin, V.V. Starinsky, A.O. Shakhzadova. Moscow: MNIOI im. P.A. Gertsena – filial FGBU “NMITS radiologii” Minzdrava Rossii, 2024. 276 p. (In Russ.).Злокачественные новообразования в России в 2023 году (заболеваемость и смертность). Под ред. А.Д. Каприна, В.В. Старинского, А.О. Шахзадовой. Москва. МНИОИ им. П.А. Герцена − филиал ФГБУ «НМИЦ радиологии» Минздрава России, 2024. 276 с.Siegel R.L., Kratzer T.B., Giaquinto A.N. et al. Cancer statistics, 2025. CA Cancer J Clin 2025;75(1):10–45. DOI: 10.3322/caac.21871Pokataev I.A., Dudina I.A., Kolomiets L.A. et al. Ovarian cancer, primary peritoneal cancer, and fallopian tube cancer. Zlokachestvennye opukholi = Malignant Tumors 2024;14(3s2–2):82–101. DOI: 10.18027/2224-5057-2024-14-3s2-1.2-02Покатаев И.А., Дудина И.А., Коломиец Л.А. и др. Рак яичников, первичный рак брюшины и рак маточных труб. Злокачественные опухоли 2024;14(3s2–2):82–101. DOI: 10.18027/2224-5057-2024-14-3s2-1.2-02Ledermann J.A., Matias-Guiu X., Amant F. et al. ESGO–ESMO–ESP consensus conference recommendations on ovarian cancer: pathology and molecular biology and early, advanced and recurrent disease. Ann Oncol 2024;35(3):248–66. DOI: 10.1016/j.annonc.2023.11.015Pignata S., Cecere S.C., Du Bois A. et al. Treatment of recurrent ovarian cancer. Ann Oncol 2017;28(suppl_8):viii51–6. DOI: 10.1093/annonc/mdx441Miras I., Estévez-García P., Muñoz-Galván S. Clinical and molecular features of platinum resistance in ovarian cancer. Crit Rev Oncol Hematol 2024;201:104434. DOI: 10.1016/j.critrevonc.2024.104434Havasi A., Cainap S.S., Havasi A.T., Cainap C. Ovarian cancer – insights into platinum resistance and overcoming it. Medicina (Kaunas) 2023;59(3):544. DOI: 10.3390/medicina59030544Baert T., Ferrero A., Sehouli J. et al. The systemic treatment of recurrent ovarian cancer revisited. Ann Oncol 2021;32(6):710–25. DOI: 10.1016/j.annonc.2021.02.015Monk B.J., Herzog T.J., Tewari K.S. Evolution of chemosensitivity and resistance assays as predictors of clinical outcomes in epithelial ovarian cancer patients. Curr Pharm Des 2016;22(30):4717–28. DOI: 10.2174/1381612822666160505114326Имянитов Е.Н. Принципы индивидуализации противоопухолевой терапии. Практическая онкология 2013;14(4):187–94. Imyanitov E.N. Principles of individualization of antitumor therapy. Prakticheskaya onkologiya = Practical Oncology 2013;14(4):187–94.Имянитов Е.Н. Принципы индивидуализации противоопухолевой терапии. Практическая онкология 2013;14(4):187–94.Kirsanov K.I., Kuzin K.A., Fetisov T.I. et al. Methodological approaches to the determination of chemoresistance of human cancer cells to anti-cancer drugs. Sibirskiy onkologicheskiy zhurnal = Siberian Journal of Oncology 2020;19(3):122–36. (In Russ.). DOI: 10.21294/1814-4861-2020-19-3-122-136Кирсанов К.И., Кузин К.А., Фетисов Т.И. и др. Методические подходы к экспериментальному тестированию резистентности клеток опухоли человека к химиотерапии. Сибирский онкологический журнал 2020;19(3):122–36. DOI: 10.21294/1814-4861-2020-19-3-122-136Singh T., Neal A.S., Moatamed N.A., Memarzadeh S. Exploring the potential of drug response assays for precision medicine in ovarian cancer. Int J Mol Sci 2021; 22(1):305. DOI: 10.3390/ijms22010305Blom K., Nygren P., Larsson R., Andersson C.R. Predictive value of ex vivo chemosensitivity assays for individualized cancer chemotherapy: a meta-analysis. SLAS Technol 2017;22(3):306–14. DOI: 10.1177/2472630316686297Maru Y., Hippo Y. Current status of patient-derived ovarian cancer models. Cells May 2019;8(5):505. DOI: 10.3390/cells8050505Blumenthal R.D. An overview of chemosensitivity testing. Methods Molecul Med 2005:110:3–18. DOI: 10.1385/1-59259-869-2:003Grendys E.C., Florica J.V., Orr J.W. et al. Overview of a chemoresponse assay in ovarian cancer. Clin Transl Oncol 2014;16(9):761–9. DOI: 10.1007/s12094-014-1192-8Konecny G., Crohns C., Pegram M. et al. Correlation of drug response with the ATP tumorchemosensitivity assay in primary FIGO stage III ovarian cancer. Gynecol Oncol 2000;77(2):258–63. DOI: 10.1006/gyno.2000.5728Kurbacher C.M., Cree I.A. Chemosensitivity testing using microplate adenosine triphosphate-based luminescence measurements. Methods Mol Med 2005;2005;110:101–20. DOI: 10.1385/1-59259-869-2:101Andreotti P.E., Cree I.A., Kurbacher C.M. et al. Chemosensitivity testing of human tumors using a microplate adenosine triphosphate luminescence assay: clinical correlation for cisplatin resistance of ovarian carcinoma. Cancer Res 1995;15;55(22):5276–82.Cortesi M., Warton K., Ford C.E. Beyond 2D cell cultures: how 3D models are changing the in vitro study of ovarian cancer and how to make the most of them. Peer J 29;12:e17603. DOI: 10.7717/peerj.17603Denry Sato J., Kan M. Media for culture of mammalian cells. Curr Protoc Cell Biol. 2001;Chapter 1:Unit 1.2. DOI: 10.1002/0471143030.cb0102s00Neubauer H., Stefanova M., Solomyer E. et al. Predicting resistance to platinum-containing chemotherapy with the ATP tumor chemosensitivity assay in primary ovarian cancer. Anticancer Res 2008;28(2A):949–56.Nanki Y., Chiyoda T., Hirasawa A. et al. Patient-derived ovarian cancer organoids capture the genomic profiles of primary tumours applicable for drug sensitivity and resistance testing. Sci Rep 2020;10(1):12581. DOI: 10.1038/s41598-020-69488-9Rodríguez-Corrales J., Josan J.S. Resazurin live cell assay: Setup and fine-tuning for reliable cytotoxicity results. Methods Mol Biol 2017;1647:207–219. DOI: 10.1007/978-1-4939-7201-2_14Gong X., Liang Z., Yang Y. et al. A resazurin-based, nondestructive assay for monitoring cell proliferation during a scaffold-based 3D culture process. Regen Biomater 2020;7(3):271–81. DOI: 10.1093/rb/rbaa002